【作者机构】阳山县黄坌镇动物卫生监督分所； 佛山科学技术学院 【分 类 号】S852.61 【分类导航】农业科学->畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂->动物医学（兽医学）->兽医基础科学 【关 键 词】致病性大肠杆菌 分离鉴定 生化试验 药敏试验 【摘 要】从佛山市三水区某鸭养殖场送检的疑似大肠杆菌病的病死鸭中,采集病死鸭的肝脏、脾脏进行细菌的分离培养、染色镜检、生化鉴定,分离鉴定出鸭大肠杆菌。生化试验结果表明,该菌可分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖;对尿素反应呈阴性;硝酸盐反应呈阴性;枸橼酸盐反应呈阴性;硫化氢反应呈阴性。对该菌株采用PCR技术对16SrRNA进行扩增,并且对扩增结果进行测序分析,结果显示,该菌株与大肠杆菌的相似性为99%以上,所以判定该分离菌为大肠杆菌。经药敏试验后,结果表明,该菌株对头孢曲松、头孢噻肟、丁胺卡那、氯霉素等7种药物高度敏感,而对临床上常用的青霉素、阿莫西林、利福平等抗菌药物有较强的耐药性。综合上述结果,该病例可初步确诊为大肠杆菌病,且该菌具有多重耐药性。本研究为临床防治鸭大肠杆菌提供一定的理论依据,并为制备鸭大肠杆菌自家苗奠定基础。 大曲中产果胶酶微生物的分离鉴定及其产酶活力评价研究[J].科技风,2020,第9期 为研究大曲中微生物的组成,分析产果胶酶的特征采取研究的方式,研究泸州老窖酿酒大曲中微生物的分离鉴定情况。运用两种霉菌测定酶活筛选出活力最高的霉菌。一直以来中国传统发酵技术的运用,广泛在调味品行业、酿酒行业,在饮食上有非常深厚的影响。白酒酿造的时候会以"大曲"为发酵剂进行发酵,大曲含有众多的微生物和酶。但是在目前人们对酶的认识还极度缺乏,因此对大曲中产果胶酶微生物的分离鉴定及其产酶活力评价研究有很重要的意义。 裂叶荨麻体外降糖活性化学成分[J].食品工业科技,2020,第8期 目的:研究裂叶荨麻体外降糖活性及化学成分。方法:利用活性追踪法,通过α-葡萄糖苷酶抑制作用比较裂叶荨麻根、茎、叶体外降糖活性,比较根不同极性溶剂萃取相的体外活性。通过硅胶色谱、重结晶进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构,再评价其体外活性成分。结果:裂叶荨麻根乙醇提取物的乙酸乙酯相体外降糖活性最强,IC₅₀值为8.499 mg/mL,从中分离出6个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇、对羟基肉桂酸甲酯、正十六烷酸、对甲氧基苯甲醛、反式-对羟基肉桂酸、胡萝卜苷。化合物反式-对羟基肉桂酸和胡萝卜苷对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较强,其IC₅₀值分别为5.234、1.693 mg/mL。结论:裂叶荨麻根乙醇提取物的乙酸乙酯相中的化学成分体外降糖活性较为明显。 湖南剁辣椒中优良乳酸菌的筛选鉴定及其发酵辣椒汁风味研究[J].食品工业科技,2020,第8期 以湖南自然发酵剁辣椒为研究对象,分离筛选高产酸乳酸菌,利用形态观察和16S rDNA对其进行鉴定。通过生长曲线、耐酸性、耐盐性等生物学特性研究获得优良乳酸菌菌株,对其发酵辣椒汁过程中的乳酸菌数、pH与风味挥发性成分进行比较。结果表明,自然发酵剁辣椒中分离出3株高效产酸菌株BLHN3、EJT2、PDJ1均被鉴定为发酵乳杆菌,其中,PDJ1菌株耐胁迫能力最强;辣椒汁发酵过程中乳酸菌数呈升高趋势,pH逐渐下降,PDJ1菌株发酵液的pH最低;固相微萃取-气相色谱-质谱技术检测发酵辣椒汁挥发性成分比较:BLHN3(37种)>PDJ1(34种)>EJT2(28种),其中BLHN3产挥发性成分亚油酸乙酯、乙酸乙酯和辛酸乙酯相对含量最高,PDJ1产特殊呈香物质(E)-2-己烯-1-醇、香叶醇等相对含量最高,赋予辣椒汁果香、清香。BLHN3和PDJ1菌株发酵辣椒汁相对EJT2菌株风味较突出。 采后番木瓜果实炭疽病病原菌分离鉴定及其拮抗菌的筛选[J].食品工业科技,2020,第6期 从采后发病番木瓜果实上分离炭疽病的病原菌,同时采用平板对峙法和滤纸片法从番木瓜果园土壤中筛选得到炭疽菌的拮抗菌W-2。通过形态学和分子生物学分别鉴定了病原菌和拮抗菌相关种属,并测试了拮抗菌W-2的拮抗活性。结果表明:番木瓜炭疽病病原菌鉴定为番木瓜炭疽菌Glomerella magna,拮抗菌W-2为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)。拮抗菌W-2能够引起Glomerella magna菌丝体膨大和孢子畸形,且W-2浓度为1×108CFU/m L时,对菌丝生长抑制作用最强,浓度为1×10~8和1×10~9CFU/m L时,对孢子萌发的抑制作用最为显著(P <0.05)。活体生防实验表明,浓度为1×108CFU/m L的W-2菌悬液处理能够有效控制番木瓜果实炭疽病病斑的扩展,并显著降低果实的发病率(P <0.05)。 一株α-淀粉酶产生菌的分离、鉴定及产酶条件研究[J].食品研究与开发,2020,第6期 为获得具有高产α-淀粉酶能力的菌株,从不同土壤环境中分离产酶菌株,对其进行分类鉴定和产酶条件研究。通过透明圈法初筛、3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法复筛分离得到产α-淀粉酶能力较强的菌株,利用形态学和生理生化反应特征,结合16S rDNA序列分析,对其进行分类鉴定;通过单因素试验和正交试验确定该菌株的最佳产酶条件。结果表明:从土壤环境中分离得到一株产α-淀粉酶菌株MF04,初步鉴定为蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus),其初始产酶活力为32.5 U/mL;产酶条件试验结果显示其最适培养温度为37℃,初始pH值为6.0,培养时间为72 h,经优化后液体发酵得到的粗酶液酶活力为60.2 U/mL,是优化前的85.2%。因此分离得到菌株MF04在工业生产中具备潜在开发价值。 南昆山毛叶茶三种多酚的分离纯化及抗氧化研究[J].食品工业科技,2020,第5期 本研究以南昆山毛叶绿茶为材料,通过30%乙醇、乙酸乙酯提取,进而采用羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）柱层析和制备型高效液相色谱分离纯化得到3种多酚单体物质;通过高效液相色谱-串联质谱、核磁共振和红外光谱鉴定单体结构;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2,2′-联氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）两种自由基的清除能力、铁离子还原能力（FRAP）和氧自由基的吸收能力（ORAC）为指标,运用L-O₂肝细胞氧化应激模型,综合评价3种多酚单体物质的抗氧化活性。结果:从南昆山毛叶茶中分离得到3种多酚单体物质,分别为没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）、1,2,4,6-四没食子酰葡萄糖（1,2,4,6-GA-glc）、儿茶素-3,5-二没食子酸酯（GC-3,5-diGA）,其中后2种为茶叶中的特殊多酚物质;纯度分别为98%、96%、97%,得率分别为2.45%、0.55%、0.31%;DPPH、ABTS和FRAP三种化学抗氧化结果基本一致:GCG>GC-3,5-diGA>1,2,4,6-GA-glc,ORAC法的结果与此相反,1,2,4,6-GA-glc的作用强于GCG和GC-3,5-diGA;高剂量的GCG、1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA预处理后,受氧化应激的L-O₂细胞存活率分别提高了26.98%±1.96%、70.87%±3.61%和35.58%±5.37%。结论:通过Sephadex LH-20柱层析和制备型高效液相色谱技术,得到高纯度的GCG、1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA;抗氧化结果显示,GCG具有较强的化学抗氧化能力,1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA具有强细胞抗氧化能力。 Hartley豚鼠源链球菌的分离鉴定及防治措施[J].山东畜牧兽医,2020,第4期 2017年4月,山东省济南市某豚鼠饲养场发生以呼吸系统为主要症状的疾病,伴随咳嗽、气喘、脓性鼻涕直至死亡。养殖场采集样品后,进行病原分离鉴定,16srRNA细菌鉴定,药敏试验等实验操作。最终确定致病菌为马链球菌兽疫亚种。通过药敏试验筛选出有效抗生素阿莫西林等药物进行治疗,豚鼠临床症状明显改善,病死率降低,预后良好。 鹅星状病毒的分离鉴定及其在雏鹅体内的分布规律[J].畜牧与兽医,2020,第4期 研究目的旨在鉴定引起雏鹅痛风病的病原,并观察其在雏鹅体内主要器官中的分布、持续时间以及排毒周期。通过鹅胚绒毛尿囊膜接种法分离病原,利用RT-PCR检测、电镜观察、动物回归、基因序列分析等方法确定该病毒为鹅星状病毒,命名为GAstV-AH;利用RT-PCR方法检测该病毒在雏鹅体内的分布,以及病毒的排毒周期。受试雏鹅临床病理变化显示,患鹅肾脏苍白肿大,心脏、肝脏呈现尿酸盐沉积为主要特征的病变;自病死雏鹅的肝、肾组织中分离得到1株病毒,该分离毒能致死鹅胚,致死率约为40%～60%,死亡鹅胚出现绒毛尿囊膜增厚、胚体充血并伴有生长抑制;电镜观察,死亡鹅胚尿囊液中病毒粒子呈球状,无囊膜,直径约为28～30 nm;该病毒人工感染1日龄雏鹅后可复制出与临床自然发病雏鹅相同的临床症状和病理变化,并能从发病组织中分离到病毒;分离毒对氯仿、胰蛋白酶等制剂不敏感,对热处理稳定,对酸稍不稳定;该病毒核酸为单链RNA,由3′UTR、5′UTR,ORF1a、ORF1b、ORF23个开放阅读框和一个poly(A)尾组成,将ORF2编码的氨基酸进行进化树分析发现,其与已发表的3株鹅星状病毒同源性在98.5%～99.2%;该病毒在实验室条件下感染雏鹅,在感染后2～12 d能检测到排毒,12 d后停止排毒,直至30 d未再次出现排毒;感染鹅的心、肝、脾、肺、肾脏在攻毒后2～8 d内,RT-PCR法对病毒的检出率为100%,12～16 d的检出率为50%～70%,20～30 d后不再检出该病毒,肠中未检出该病毒。 杭州地区猫杯状病毒的分离鉴定及VP1基因序列分析[J].畜牧与兽医,2020,第4期 猫杯状病毒(feline calicivims, FCV)是引起猫呼吸道疾病的一种常见病原,呈世界性分布,常在猫群中爆发流行。为了解我国FCV的流行情况及分子生态学特征,本研究对杭州地区收集的48份疑似FCV感染病料,进行了PCR鉴定、病毒分离培养,以及基于VP1基因序列的系统发育树分析。RT-PCR鉴定的结果显示,有32份病料可判为阳性;这32份病料接种的F81细胞,均出现明显的细胞病变。VP1基因序列分析显示,32株分离毒间的核苷酸同源性为69.2%～99%,氨基酸同源性为82.1%～99.9%。与国外分离株相比,32株分离株同国内分离株的同源性更高。系统发育树分析显示,32株分离株有12株与国内分离株遗传关系较近,15株与英国株遗传关系较近,别外4株与多国分离株形成独立分支。对VP1 D-E区的B细胞线性表位分析发现,D区和conE区的2个表位比较保守,而5′HRV区的表位存在较大变异。尽管32个毒株分离于同一地区和相近的时间段,主要抗原VP1基因差异仍然较大,多数达20%～30%不等。以上结果表明,FCV在杭州地区广泛流行,且呈现明显的遗传多样性,给病毒的分子流行病学监测和疫苗防控带来巨大挑战。 我国不同地区鸡源致病性大肠杆菌分离株的PFGE分子分型[J].中国动物检疫,2020,第4期 为了解我国鸡源致病性大肠杆菌的分子流行病学状况,利用PFGE分子分型方法,对2017年分离自山东、吉林、新疆、西藏等7个代表性区域的130株大肠杆菌分离株进行了分子分型研究。结果显示:130株大肠杆菌共分为105个带型,其中33株菌株的图谱相似度在90%以上;不同来源菌株的PFGE带型差别较明显,即使是相同来源菌株,PFGE带型差异同样显著,显示了分离株菌株的遗传多样性。本研究为指导我国鸡群大肠杆菌病防控以及鸡源致病性大肠杆菌引发疾病或食品安全突发事件的追踪溯源提供了依据。

文章来源：《畜禽业》 网址: http://www.cqybjb.cn/qikandaodu/2020/0522/334.html